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免疫細(xì)胞分型常見(jiàn)標(biāo)志物大串燒(一)——T細(xì)胞分型標(biāo)志物
發(fā)表者:北京博奧森生物      發(fā)表時(shí)間:2019-8-12



免疫分型(immunophenotyping)是指根據(jù)存在于細(xì)胞表面、核或細(xì)胞質(zhì)中的標(biāo)記物或抗原的類型,利用基于抗體的對(duì)異質(zhì)細(xì)胞群進(jìn)行分析,以鑒定多種目標(biāo)細(xì)胞群的存在及比例。通過(guò)使用特異性識(shí)別不同細(xì)胞類型標(biāo)記物或抗原的抗體,從而幫助鑒定細(xì)胞的譜系。例如腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)、浸潤(rùn)免疫細(xì)胞的分析、白血病的診斷等。免疫分型可以利用組織切片(新鮮或固定組織)通過(guò)免疫組化方法以及利用細(xì)胞懸液通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行分析。

流式細(xì)胞術(shù)可以說(shuō)是用于探測(cè)人類免疫表型的首選技術(shù),特別是由于它可以在諸如血液的復(fù)雜混合物中通過(guò)測(cè)量許多單個(gè)細(xì)胞上的多個(gè)參數(shù),從而鑒定和分析包括稀有亞群在內(nèi)的許多細(xì)胞亞群。并且由于可用的抗體試劑的擴(kuò)大和實(shí)驗(yàn)方案的不斷調(diào)整,流式細(xì)胞術(shù)不僅可用于評(píng)估細(xì)胞表面蛋白的表達(dá),還可以用于評(píng)估胞內(nèi)蛋白的表達(dá)或修飾水平以及細(xì)胞因子的水平。



使用細(xì)胞表面標(biāo)記的特定組合對(duì)免疫細(xì)胞亞群進(jìn)行定義是一個(gè)不斷發(fā)展的過(guò)程,特別是那些高頻研究的細(xì)胞類型。這些類型包括調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)、分泌IL-17的T輔助細(xì)胞(Th17)、樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)和自然殺傷細(xì)胞(NK)。盡管新標(biāo)記的發(fā)現(xiàn)和新的細(xì)胞子集將在未來(lái)一段時(shí)間內(nèi)持續(xù)下去,然而,我們還是希望細(xì)胞免疫學(xué)領(lǐng)域具有足夠的成熟程度,以達(dá)到對(duì)大多數(shù)共同研究的免疫細(xì)胞亞群的定義達(dá)成共識(shí)。換句話說(shuō),應(yīng)當(dāng)能夠定義一種相對(duì)穩(wěn)定的標(biāo)記集合,其描繪T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核細(xì)胞和DC細(xì)胞等主要類型。因此,我們通過(guò)總結(jié)文獻(xiàn)確定各個(gè)細(xì)胞類型的關(guān)鍵分化標(biāo)記,并且總結(jié)目前用于人體免疫監(jiān)測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化免疫表型分型組合。




T細(xì)胞

T淋巴細(xì)胞可在CD3表達(dá)的基礎(chǔ)上被免疫表型化,隨后進(jìn)一步細(xì)分(如CD8+殺傷T細(xì)胞和CD4+輔助性T細(xì)胞)。此外,T細(xì)胞表型是靈活的,可以不同的微環(huán)境發(fā)生變化;表型也可能重疊在多個(gè)T細(xì)胞群體之間。此外,T細(xì)胞亞群的分類可能是根據(jù)響應(yīng)某些刺激或磷酸化免疫信號(hào)蛋白如STAT蛋白分泌特定細(xì)胞因子水平來(lái)確定。


殺傷T細(xì)胞(又被稱作細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞CD8+)能識(shí)別抗原,這些抗原是由感染因子釋放的,并與宿主細(xì)胞結(jié)合。殺傷T細(xì)胞能夠識(shí)別多種細(xì)胞類型和病原體并與之相互作用。T細(xì)胞受體與外源抗原結(jié)合,觸發(fā)細(xì)胞毒素向受感染細(xì)胞釋放,導(dǎo)致細(xì)胞死亡。殺傷T細(xì)胞的主要鑒定標(biāo)志物就是CD8+,但是如果需要根據(jù)不同生理狀態(tài)下對(duì)殺傷性T細(xì)胞進(jìn)行功能鑒定,還可以進(jìn)一步增加其他標(biāo)志物形成標(biāo)志物組合。比如,對(duì)殺傷性T細(xì)胞進(jìn)一步定義幼稚、中央記憶性、效應(yīng)記憶性效應(yīng)T細(xì)胞亞群的經(jīng)典標(biāo)志物是基于趨化因子受體7(CCR7;也稱為CD197)和CD45RA或CD45RO的表達(dá)情況;對(duì)殺傷性T細(xì)胞進(jìn)一步分析其活化狀態(tài)是基于HLA-DR和CD38的表達(dá)情況1-3


輔助T細(xì)胞(即Th1、Th2、Th9、Th17和Tfh細(xì)胞)具有很少的細(xì)胞毒性活性并且分泌對(duì)其它白細(xì)胞(例如B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞或中性粒細(xì)胞)起作用以清除病原體的細(xì)胞因子。除了CD4這一共有標(biāo)志物,不同輔助T細(xì)胞還有各自的常用鑒定標(biāo)志物組合,如下圖所示:

調(diào)節(jié)性T細(xì)胞即Treg在維持免疫穩(wěn)態(tài)中起著重要作用,并且也與許多自身免疫性疾病有關(guān)4。迄今為止,已確定了兩種主要類別的CD4+Treg組成型表達(dá)CD25和FoxP3的天然Tregs(nTreg)以及誘導(dǎo)后激活表達(dá)CD25和FoxP3的誘導(dǎo)Tregs(iTreg)5。人和小鼠Treg的CD25表達(dá)情況不同。在小鼠中,所有CD25+細(xì)胞都被認(rèn)為是Treg;而在人的免疫系統(tǒng),只有那些高水平表達(dá)CD25的細(xì)胞被認(rèn)為是Treg6


iTreg來(lái)源于胸腺,在某些抗原和專門(mén)的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子(如TGF-1、IL-10和IL-2)的刺激下,由單陽(yáng)性CD4細(xì)胞分化為表達(dá)CD25和Foxp3的Tregs6。還報(bào)告了iTreg群體具有一定的可塑性,可以轉(zhuǎn)化為其他T細(xì)胞亞型,例如Th1和Th17細(xì)胞6。

目前,F(xiàn)OXP3是Treg的最明確的標(biāo)記,盡管有報(bào)道發(fā)現(xiàn)少數(shù)Treg亞群是FOXP3-7。轉(zhuǎn)錄因子Foxp3作為T(mén)regs的標(biāo)志又進(jìn)一步推動(dòng)了其他的Treg標(biāo)記的發(fā)現(xiàn),包括CD127。若干已發(fā)表的報(bào)告證明CD127表達(dá)與Foxp3呈負(fù)相關(guān)8。比如,利用CD4+、CD25+和CD127-組合分選策略,可用于獲得體外可擴(kuò)增的Treg細(xì)胞。


Bioss具有豐富的T細(xì)胞分型相關(guān)產(chǎn)品,代表產(chǎn)品如下:

另外,Bioss近期正在進(jìn)行直標(biāo)一抗的試用和專屬優(yōu)惠活動(dòng),很多免疫細(xì)胞分型標(biāo)志物相關(guān)多種熒光標(biāo)記一抗位列其中,可以滿足您的多種需求,并有三重好禮等您來(lái)拿!讓您足不出戶,立享熒光盛宴!

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