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新品上市 | 清晰高效又便捷 多彩科研新視界-Bioss mIHC 試劑盒
發(fā)表者:北京博奧森生物      發(fā)表時間:2025-2-27


       近年來,隨著病理學(xué)研究的不斷深入,多重免疫熒光(mIHC)技術(shù)正逐步興起。mIHC是一種可以在一張組織樣本上實現(xiàn)多重分子標(biāo)記的免疫標(biāo)記技術(shù),有助于確定靶標(biāo)的亞細(xì)胞定位、識別多種細(xì)胞類型以及解決生物標(biāo)志物的相對接近度,是研究蛋白質(zhì)表達(dá)、細(xì)胞標(biāo)志物以及分子間相互作用的重要工具。

       Bioss將自主研發(fā)生產(chǎn)的高性能熒光染料與TSA酪胺信號放大技術(shù)結(jié)合,重磅推出高靈敏度的多重免疫熒光產(chǎn)品mIHC試劑盒,幫助您實現(xiàn)對低豐度靶標(biāo)的可靠檢測與成像,為您的高分文章增添色彩!

      讓我們先來欣賞幾張使用Bioss mIHC試劑盒得到的多色圖像。

 

腸癌組織

人腦組織

大鼠腦組織

小鼠腦組織

 

技術(shù)原理

       酪酰胺信號放大(Tyramide signal amplification, TSA)技術(shù)是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測方法。其原理是利用酪胺的過氧化物酶反應(yīng),酪胺熒光素底物在HRP和H2O2的作用下被活化,產(chǎn)生的活化熒光底物能與目標(biāo)蛋白的蛋白殘基共價結(jié)合,導(dǎo)致在抗原-抗體結(jié)合位點大量沉積熒光素,實現(xiàn)信號放大。通過熱修復(fù)處理,將前一輪非共價結(jié)合的抗體洗掉,而熒光素穩(wěn)定結(jié)合在蛋白上,進(jìn)行下一輪染色。直至所有抗體孵育結(jié)束,進(jìn)行核染色,封片,掃描。

 

技術(shù)優(yōu)勢

       相比于傳統(tǒng)的IF來說,多重免疫熒光的染色分辨率更高,熒光信號更強(qiáng)、更加穩(wěn)定,并且不限制一抗種屬,大大降低了實驗成本。

實驗步驟

 

mIHC 試劑盒產(chǎn)品線

       保存條件:避光保存,-20℃可保存12個月,開封后2-8℃保存。預(yù)期用途:用于石蠟組織切片的多重?zé)晒馊旧?,配合Bioss常規(guī)兔來源或鼠來源的一抗使用。

產(chǎn)品優(yōu)勢

試劑優(yōu)化:本試劑盒中的修復(fù)/速除二合一緩沖液效果遠(yuǎn)勝普通修復(fù)液,顯著杜絕“串染”、“過修復(fù)”現(xiàn)象;快速反應(yīng)緩沖液使反應(yīng)體系不再依賴H2O2,將反應(yīng)時間從10-20 min縮短至10 sec-5 min;水晶封片劑采用抑制氣泡配方及增強(qiáng)型防淬滅配方,有效防止封片過程產(chǎn)生氣泡,并使TSA熒光可保存6個月-2年。

信號穩(wěn)定:TSA標(biāo)記是穩(wěn)定的共價結(jié)合,熒光信號穩(wěn)定,基本不受連續(xù)孵育、熱修復(fù)和抗體剝離處理影響。

操作簡單:可以使用同一種屬的不同一抗搭配同一二抗使用,解除抗體種屬限制,降低了實驗設(shè)計的難度和復(fù)雜性;多輪單染,每輪獨(dú)立互不干擾,極大減少了交叉反應(yīng)對實驗設(shè)計和實驗結(jié)果的影響;簡化了實驗流程,提高了實驗效率。

節(jié)省樣本:一張切片可進(jìn)行多重靶標(biāo)深度分析,節(jié)約珍貴樣本。

高分辨率及低背景:抗體更高比例的稀釋能夠降低非特異性結(jié)合。

多靶標(biāo)同時檢測與分析:mIHC技術(shù)能夠在一張切片上同時檢測多個靶標(biāo),可以同時獲取關(guān)于細(xì)胞定量、細(xì)胞亞群分型、細(xì)胞空間排列等多個類型的信息,提供了更全面的組織分析。

高精準(zhǔn)度:mIHC技術(shù)避免了多張切片間比較可能帶來的不連續(xù)性誤差,提供了更高精準(zhǔn)度的結(jié)果。

空間位置信息的分析能力:mIHC技術(shù)易于對空間位置信息進(jìn)行分析,探究標(biāo)記物的共定位情況、表達(dá)量和空間關(guān)系,對于理解細(xì)胞間的相互作用和腫瘤微環(huán)境至關(guān)重要。

靈活的分析方式:mIHC技術(shù)的多靶標(biāo)染色結(jié)果可以靈活地進(jìn)行自由組合分析,也可以單獨(dú)拆分信號進(jìn)行分析,能夠根據(jù)實驗?zāi)康暮蛿?shù)據(jù)分析需求來定制分析方案。

定量分析:mIHC染色結(jié)果可以配合智能圖像分析軟件使用,進(jìn)行多參數(shù)分析,實現(xiàn)定量評估細(xì)胞密度、表型和定位等。

高特異性和高靈敏度:TSA信號放大,靈敏度高達(dá)傳統(tǒng)方法的100倍,能夠檢測到更低濃度的靶標(biāo),甚至是一些傳統(tǒng)方法無法檢測到的低豐度蛋白。


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